Ниже
вкратце рассмотрены некоторые примеры наблюдаемых экспериментально зависимостей
между удерживанием органических соединений и наличием в их молекуле тех или
иных структурных элементов.
Здесь
концентрации вещества, соответственно, в
жидкой и газовой фазах, а объемы этих
фаз в колонке. Эта величина равна произведению коэффициента распределения на
отношения объемов жидкой и газовой фазы в колонке.
Индексы
других стероидных соединений вычисляют интерполяцией логарифмов объемов
удерживания. Большое различие в летучести стандартов, соответствующее изменению
массы молекулы на 8 атомов углерода, приводит к относительно низкой точности
определения стероидных чисел.
Шкала
индексов Ковача линейна во всем диапазоне, исключая небольшую область ниже 200.
Величина их зависит только от природы неподвижной жидкой фазы и даже
температура оказывает на нее относительно малое влияние.
В большинстве случаев при записи такой
хроматограммы измеряется разница каких-либо свойств чистого газа-носителя и
газа, выходящего из колонки. Поэтому такая хроматограмма называется
дифференциальной.
Преимуществом
этого метода является возможность в чрезвычайно широких пределах изменять свойства
неподвижной жидкой фазы и добиваться таким образом разделения даже очень
близких по свойствам веществ.
В
течение последних 10-15 лет такие хроматографические методы, как бумажная и
ионообменная хроматография, стали в биохимических лабораториях обычными
методами исследования. В той или иной мере эти методы знакомы и медицинским
работникам многих специальностей.
В Волгограде проходит первый этап Всероссийской антинаркотической акции «Сообщи, где торгуют смертью». На специально выделенные телефонные линии специалисты наркоконтроля до 29 марта включительно будут принимать информацию от граждан об известных им фактах продажи и потребления наркотиков. Отметим, что только в ходе проведения подобной акции в ноябре прошлого года от жителей региона было получено 188 обращений, при отработке которых возбуждено 173 уголовных дела, выявлено и ликвидировано 11 наркопритонов и 31 точка сбыта наркотиков.
В определенных случаях избавиться от наркотической зависимости помогает медикаментозное кодирование. При кодировании в организм наркозависимого пациента вводят противоядие, которое действует длительный период. Это такой же действенный метод, как и кодирование по методу Довженко, хотя принципы лечения отличаются существенно.
Вот
почему тщательное и всестороннее изучение функционального состояния коры
надпочечников, а также других желез внутренней секреции, продуцирующих
важнейшие стероидные соединения, является чрезвычайно важным и представляет не
только научный, но и принципиальный практический интерес.
Указанные
обстоятельства стимулируют разработку и применение новых методов исследования,
таких, как масс-спектрометрия, спектроскопия и газовая хроматография. Первые
два метода связаны с необходимостью иметь весьма дорогостоящее оборудование при
значительной трудности его эксплуатации и сложности интерпретации полученных
результатов.
Помимо
перечисленных, стероидный анализ методом газо-жидкостной хроматографии возможен
и производится на фазах и некоторых
других. Приготовление набивок для хроматографических колонок целесообразно
производить по наиболее употребительной методике Horning, Moscatelli и Sweeley
(1959) или по одной из методик, описанной в первой части настоящей работы.
Разделению
сложных смесей стероидов и желчных кислот методом газовой хроматографии
посвящено исследование Bloomfield (1962), в котором изложена методика и описано
ее применение как для качественного, так и для количественного анализа этих
соединений в фекальных экстрактах.
Для
удобства ознакомления с материалом последний соответственно распределен по
основным группам стероидных соединений - кортикостероидам (преимущественно
глюкокортикоидного ряда), эстрогенам и андрогенам, а также применительно к
общим вопросам, имеющим самое непосредственное отношение к физико-химическим аспектам
обсуждаемой проблемы.
Данные,
полученные указанными авторами, являются до настоящего времени одними из
наиболее полных и интересных из числа опубликованных в зарубежной литературе и
содержат сведения по всем основным этапам определения стероидных гормонов в
биологических объектах.
Patti
с сотрудниками (1963) для отделения кортикостероидов от 17-кетостероидов и для
очистки экстрактов предпочитают пользоваться колонками с флоризилом и окисью
алюминия.
Учитывая
только что сказанное, при работе со стероидами мы поступали следующим образом.
В случае необходимости, особенно при налаживании и отработке различных
вариантов обнаруживания кортикостероидов на пластинках, УФ свет применяли
только для качественного анализа.
Далее
в обе пробирки добавляют 4,4 мл ацетатного буфера с рН 4,5 и термостатируют в
течение часа при температуре 38°. Для прекращения реакции пробирки из
термостата извлекают и в них добавляют по 5 мл глицинового буфера с 10,4, после чего ко второй пробе прибавляют
0,5 мл раствора субстрата.
