Хроматографирование

Учитывая только что сказанное, при работе со стероидами мы поступали следующим образом. В случае необходимости, особенно при налаживании и отработке различных вариантов обнаруживания кортикостероидов на пластинках, УФ свет применяли только для качественного анализа. В случае необходимости количественных измерений использовали ультрафиолетовую часть спектра для освещения стандартов, закрывая ту часть пластинки, где располагались разделенные стероидные экстракты.

С пластинки пятна последовательно элюировались, элюат центрифугировался, упаривался и часть его вводилась в хроматограф для количественного определения.

При выполнении этой части настоящей работы использовался Панхроматограф фирмы W. G, Англия. Разделение производилось на колонках длиной 120-200 см и внутренним диаметром 4 мм из боросиликатного стекла, наполненных 1-5% жидких фаз и, которые были нанесены на твердый носитель силанизированные хромосорб  или газхром.  Детектирование осуществлялось аргоновым ионизационным детектором. Напряжение, подаваемое на детектор, колебалось в зависимости от характера и целей исследования в пределах 750-1750 в, чувствительность ампера. Газ-носитель - аргон. Давление газа на входе в колонку 1500-2150 мм рт. ст. Газопоток - в диапазоне от 30 до 120 мл/мин.