По
мнению автора, характер температурной декомпозиции кортизола, кортизона и
других близких им стероидных соединений и их переход в соответствующие
17-кетостероиды зависит от наличия и количества окси- и гидрокситрупп, которые
они содержат.
Суточная
моча доводится уксусной кислотой.
Гидролиз ферментативный с инкубацией в течение 72 часов при температуре 37°.
Далее мочи доводится до 1,0 раствором
серной кислоты и проводится продолжительная экстракция порциями эфира по 250 мл
(на протяжении 48 часов).
Анализ
стероидов производился на хроматографе, снабженном аргоновым ионизационным детектором,
содержащим, при температуре колонки 197-206°, испарителя - 276-285-295°,
детектора - 223-240°, потоке аргона 55-60 мл/мин, напряжении на детекторе 900 в
и чувствительности 3 X 108 а.
Предварительно
авторами было произведено исследование меры экстракции фенолстероидов из водных
растворов с различным содержанием эстрона, эстрадиола и эстриола в последних.
Щелочные
экстракты соединяются и добавлением серной кислоты доводятся до рН 5, после
чего экстрагируются эфиром (таким же объемом) и вновь промываются раствором
двууглекислого и углекислого натрия, а также водой.
Методика
в основном заключается в гидролизе связанных с глюкуроновой кислотой стероидов глюкуронидазой,
экстракции, предварительном выделении стероидов в тонком слое окиси алюминия,
переводе прегнандиола, прегнантриола и прегнантриолона в триметилсилиловые
эфиры и определении полученных производных методом газо-жидкостной
хроматографии.
После выдерживания реагентов в течение часа в
закупоренной пробирке триметилсилиловые эфиры стероидов можно использовать для
их разделения методом газо-жидкостной хроматографии.
Правильно распознать признаки наркотической зависимости крайне важно, так как это помогает вовремя оказать помощь человеку, страдающему наркоманией. Особенно важно знать особенности проявления заболевания родителям, беспокоящимся об образе жизни своего ребёнка.
Всем известно, что употребление алкоголя небезопасно для больных диабетом, поэтому появилось мнение, что рекреационное употребление наркотических веществ, возможно, менее вредно.
В определенных случаях избавиться от наркотической зависимости помогает медикаментозное кодирование. При кодировании в организм наркозависимого пациента вводят противоядие, которое действует длительный период. Это такой же действенный метод, как и кодирование по методу Довженко, хотя принципы лечения отличаются существенно.
Вот
почему тщательное и всестороннее изучение функционального состояния коры
надпочечников, а также других желез внутренней секреции, продуцирующих
важнейшие стероидные соединения, является чрезвычайно важным и представляет не
только научный, но и принципиальный практический интерес.
Указанные
обстоятельства стимулируют разработку и применение новых методов исследования,
таких, как масс-спектрометрия, спектроскопия и газовая хроматография. Первые
два метода связаны с необходимостью иметь весьма дорогостоящее оборудование при
значительной трудности его эксплуатации и сложности интерпретации полученных
результатов.
Помимо
перечисленных, стероидный анализ методом газо-жидкостной хроматографии возможен
и производится на фазах и некоторых
других. Приготовление набивок для хроматографических колонок целесообразно
производить по наиболее употребительной методике Horning, Moscatelli и Sweeley
(1959) или по одной из методик, описанной в первой части настоящей работы.
Разделению
сложных смесей стероидов и желчных кислот методом газовой хроматографии
посвящено исследование Bloomfield (1962), в котором изложена методика и описано
ее применение как для качественного, так и для количественного анализа этих
соединений в фекальных экстрактах.
Для
удобства ознакомления с материалом последний соответственно распределен по
основным группам стероидных соединений - кортикостероидам (преимущественно
глюкокортикоидного ряда), эстрогенам и андрогенам, а также применительно к
общим вопросам, имеющим самое непосредственное отношение к физико-химическим аспектам
обсуждаемой проблемы.
Данные,
полученные указанными авторами, являются до настоящего времени одними из
наиболее полных и интересных из числа опубликованных в зарубежной литературе и
содержат сведения по всем основным этапам определения стероидных гормонов в
биологических объектах.
Patti
с сотрудниками (1963) для отделения кортикостероидов от 17-кетостероидов и для
очистки экстрактов предпочитают пользоваться колонками с флоризилом и окисью
алюминия.
Учитывая
только что сказанное, при работе со стероидами мы поступали следующим образом.
В случае необходимости, особенно при налаживании и отработке различных
вариантов обнаруживания кортикостероидов на пластинках, УФ свет применяли
только для качественного анализа.
Далее
в обе пробирки добавляют 4,4 мл ацетатного буфера с рН 4,5 и термостатируют в
течение часа при температуре 38°. Для прекращения реакции пробирки из
термостата извлекают и в них добавляют по 5 мл глицинового буфера с 10,4, после чего ко второй пробе прибавляют
0,5 мл раствора субстрата.
