Обнаружение эстрогенов в моче у женщин

Щелочные экстракты соединяются и добавлением серной кислоты доводятся до рН 5, после чего экстрагируются эфиром (таким же объемом) и вновь промываются раствором двууглекислого и углекислого натрия, а также водой. Эфирный экстракт снова выпаривается досуха, растворяется в смеси метанол-хлороформ или этанол-хлороформ 1 :1 и наносится на пластинку с силикагелем.

Тонкослойная хроматография проводится на стеклянных пластинках размером 13 X 18 см. Работа производилась либо в закрепленном, либо в незакрепленном слое адсорбента. В первом случае на каждые 3 г силикагеля добавляли до 0,5 г гипса.

Пробы на пластинку обычно наносили линейно и после подсушивания производили двукратную разгонку в системе бензол - метанол 9:1. Для разделения эстрогенов до отдельных стероидных с единений использовались также системы растворителей бензол - этанол 9:1 и эфир - гексан 6:4. 3

После ацетилирования в хроматограф вводилась либо вся фракция фенолстероидов (для окончательного разделения и одновременного количественного определения), либо отдельные эстрогены. В последнем случае (первый, естественно, более предпочтителен) газо-жидкостная хроматография использовалась лишь для количественного определения эстрогенов в вводимой пробе.

Анализ производился на хроматографе с ионизационным аргоновым детектором и стеклянными колонками, наполненными 1-5% , которые наносились на повторно промытые кислотой и силанизированные хромосорб. Температура колонки была 220-240°, детектора 250°. ОПРЕДЕЛЕНИЕ