Методика определения соединений

Суточная моча доводится  уксусной кислотой. Гидролиз ферментативный с инкубацией в течение 72 часов при температуре 37°. Далее  мочи доводится до 1,0 раствором серной кислоты и проводится продолжительная экстракция порциями эфира по 250 мл (на протяжении 48 часов). Эфирный экстракт промывается 1 н. раствором. Высушивание производится над безводным сульфатом натрия, после чего эфир выпаривается. Выделение кетостероидов производится по Girard и Sandulesco (1963).

Газохроматографический анализ проводится на хроматографе с ионизационным детектором. Колонка с 3% SE-30 на повторно промытом кислотой и силанизированном газхроме , 80-100 меш. При хроматографировании мочевых экстрактов и искусственных смесей удалось получить выход и разделение следующих стероидных соединений, относящихся к фракции 17-кетостероидов: этиохоланолона, 11-ке-тоэтиохоланолона,   оксиэтиохоланолона,   оксиандростерона; наблюдался также хороший выход андростерона и дегидроэпиандростерона, однако разделения последних при описанных выше условиях не происходило. Помимо указанного недостатка, следует также отметить сравнительную продолжительность одного анализа - до 75 минут.

Возможности определения 17-кетостероидов одновременно с прегнандиолом и эстрогенами посвящено исследование с сотрудниками (1964). Гидролиз конъюгатов 17-кетостероидов производился либо соляной кислотой, либо осуществлялся посредством ферментативного при рН 4,5. Экстракция после ферментативного гидролиза производилась пятикратно 40 мл порциями эфира. Далее экстракт промывался бикарбонатом натрия, высушивался и подвергался анализу методом газо-жидкостной хроматографии после перевода стероидов в их триметилсилиловые эфиры.