Носик
шприца укорачивается на 2-3 мм, что позволяет установить в канале иглы герметизирующую
прокладку из силиконовой резины. Длина мандрена должна быть такой, чтобы при
полностью введенном поршне он оканчивался в начале заостренной части иглы.
При
объеме шприца меньше 1 мкл диаметр поршня становится слишком мал и требуемая
жесткость штока обеспечена быть не может. Поэтому в шприцах объемом менее 1 мкл
поршнем служит проволока из нихрома, вольфрама или другого инертного материала,
перемещающаяся внутри достаточно узкого цилиндра иди непосредственно внутри
иглы.
Подобного
рода дозирующие устройства просты и надежны в работе, обладают хорошей
точностью и воспроизводимостью дозируемых объемов, однако их применение
ограничено кругом газообразных веществ.
Приготовление
наполнителя содержимого колонки для газо-жидкостной хроматографии должно
обеспечить создание на поверхности твердого носителя возможно более равномерной
пленки жидкой фазы.
К
сожалению, для разделения близких структурных и пространственных изомеров
методом газовой хроматографии на наполненных колонках в настоящее время еще
нельзя дать готовых рецептов и успех решения той или иной аналитической задачи
в значительной мере зависит от широты кругозора и изобретательности
экспериментатора.
Значительно
чаще применяются многоатомные спирты. Эти жидкие фазы использовались для
разделения фенолов терпенов, изомерных производных циклогексанола, эфиров
фталевых кислот и т. п.
Иногда
для повышения молекулярного веса и термостойкости полиэфиров прибавляют 3-5%
многоосновных спиртов (глицерин, пентаэритрат), обеспечивающих сшивание цепей
полимера.
При
использовании гидрофобного носителя, такого, как хлористый натрий, можно
проводить прямой анализ воды. В смеси со спиртами вода выходит из колонки в
соответствии со своей температурой кипения.
В определенных случаях избавиться от наркотической зависимости помогает медикаментозное кодирование. При кодировании в организм наркозависимого пациента вводят противоядие, которое действует длительный период. Это такой же действенный метод, как и кодирование по методу Довженко, хотя принципы лечения отличаются существенно.
Вот
почему тщательное и всестороннее изучение функционального состояния коры
надпочечников, а также других желез внутренней секреции, продуцирующих
важнейшие стероидные соединения, является чрезвычайно важным и представляет не
только научный, но и принципиальный практический интерес.
Указанные
обстоятельства стимулируют разработку и применение новых методов исследования,
таких, как масс-спектрометрия, спектроскопия и газовая хроматография. Первые
два метода связаны с необходимостью иметь весьма дорогостоящее оборудование при
значительной трудности его эксплуатации и сложности интерпретации полученных
результатов.
Помимо
перечисленных, стероидный анализ методом газо-жидкостной хроматографии возможен
и производится на фазах и некоторых
других. Приготовление набивок для хроматографических колонок целесообразно
производить по наиболее употребительной методике Horning, Moscatelli и Sweeley
(1959) или по одной из методик, описанной в первой части настоящей работы.
Разделению
сложных смесей стероидов и желчных кислот методом газовой хроматографии
посвящено исследование Bloomfield (1962), в котором изложена методика и описано
ее применение как для качественного, так и для количественного анализа этих
соединений в фекальных экстрактах.
Для
удобства ознакомления с материалом последний соответственно распределен по
основным группам стероидных соединений - кортикостероидам (преимущественно
глюкокортикоидного ряда), эстрогенам и андрогенам, а также применительно к
общим вопросам, имеющим самое непосредственное отношение к физико-химическим аспектам
обсуждаемой проблемы.
Данные,
полученные указанными авторами, являются до настоящего времени одними из
наиболее полных и интересных из числа опубликованных в зарубежной литературе и
содержат сведения по всем основным этапам определения стероидных гормонов в
биологических объектах.
Patti
с сотрудниками (1963) для отделения кортикостероидов от 17-кетостероидов и для
очистки экстрактов предпочитают пользоваться колонками с флоризилом и окисью
алюминия.
Учитывая
только что сказанное, при работе со стероидами мы поступали следующим образом.
В случае необходимости, особенно при налаживании и отработке различных
вариантов обнаруживания кортикостероидов на пластинках, УФ свет применяли
только для качественного анализа.
Далее
в обе пробирки добавляют 4,4 мл ацетатного буфера с рН 4,5 и термостатируют в
течение часа при температуре 38°. Для прекращения реакции пробирки из
термостата извлекают и в них добавляют по 5 мл глицинового буфера с 10,4, после чего ко второй пробе прибавляют
0,5 мл раствора субстрата.
