Самый информативный метод изучения пространственной структуры

Ценным методом для характеристики изменения лабильности и компактности макромолекул является водородно-дейтериевый обмен. По мере разрыхления макромолекулы скорость обмена ее медленно обменивающихся атомов водорода возрастает. О распаде четвертичной структуры белка судят по изменению молекулярной массы и размера молекул, пользуясь методами определения скорости седиментации, диффузии, вязкости. Изменения преимущественно в третичной структуре белка оцениваются по круговому дихроизму в области ближнего ультрафиолета. Он отражает состояние ароматических колец боковых групп аминокислотных остатков. При нарушении вторичной структуры изменяются круговой дихроизм в области дальнего ультрафиолета и дисперсия вращения плоскости поляризации. Сдвиги в состоянии отдельных боковых групп при их переходе из гидрофобного окружения в водную среду, при изменении их ближайшего соседства могут быть установлены по дифференциальному спектру поглощения, по ядерно-магнитному резонансу, по интенсивности и степени поляризации собственной флуоресценции и другими методами.

С помощью метода сканирующей микрокалориметрии глобулярных белков (химотрипсиноген, рибонуклеаза, миоглобин) П. Л. Привалов с соавторами (Privalov et al., 1971; Privalov, 1979) установил, что при постепенном нагреве белков еще в области физиологических температур, до температуры, вызывающей денатурацию, белок претерпевает предденатурационные изменения. В предденатурационой зоне по мере нарастания температуры постепенно повышается лабильность макромолекул и увеличивается частота спонтанных разрывов одиночных слабых связей. Эти явления не кооперативны и, по мнению Привалова, качественно отличаются от изменений денатурационных.