Изменение температуры

 В медико-биологических исследованиях метод абсолютной калибровки оказывается незаменимым лишь в редких случаях. К ним может относиться, например, определение малых концентраций веществ в сочетании с нерегистрируемыми детектором компонентами. Может потребовать абсолютной калибровки прибора и большая быстрота изучаемого процесса, не оставляющая времени для составления искусственных смесей.

Предложенный в 1954 г. метод внутреннего стандарта до настоящего времени является одним из наиболее удобных методов получения количественной информации. Метод заключается в том, что в исследуемую смесь добавляют точно известное количество вещества - эталона. Площадь пика этого вещества сравнивают с площадями других пиков и считают, что эти площади пропорциональны содержанию в смеси отдельных компонентов. Метод с успехом применяется при обычном хроматографическом анализе, а также при анализе микропримесей. Добавляемый к исходной смеси эталон (внутренний стандарт) должен отсутствовать в анализируемой пробе, быть термически устойчивым, обладать достаточной чистотой и хорошо разделяться в условиях хроматографического опыта со всеми компонентами изучаемой смеси.