Изучение процента живых клеток

Следует подчеркнуть, что в наших опытах лимфоциты после обработки in vitro 0,5% раствором нейтрального формалина не только дважды отмывались средой 199, по и вновь ресуспендировались в этой же среде с добавлением АВ-сыворотки на несколько суток (от 3 до 7). Это нисколько не восстанавливало способности лимфоцитов вызывать реакцию необработанной популяции лимфоцитов, не наблюдалось никакой клеточной диффе-ренцировки даже в присутствии такого сильного мито-гена, как ФГА. Необратимые изменения поверхностных и функциональных свойств лимфоцитов крови происходили после самого кратковременного (10 мин) контакта клеток с формалином. При аналогичном исследовании 0,5% раствора кислого формалина были получены такие же результаты с той лишь разницей, что процент разрушенных клеток был выше. Изучение процента живых клеток после культивирования лимфоцитов, подвергнутых обработке формалином, не позволило получить воспроизводимых результатов, так как большинство клеток было разрушено, а оставшиеся не прокрашивались трипановым синим, по-видимому, из-за фиксации формалином мембраны и цитоплазмы клеток. Имеются и другие указания, что формалин лишает клетку возможности включать суправитальные красители.

Нашим данным соответствуют результаты С. С. Фей-гельмана (1974), которому не удалось сенсибилизировать животных трансплантатами, консервированными 0,5% раствором формалина. Раствор денатурировал около 90% водорастворимых белков и инактивировал про-теолитические ферменты. В его опытах также не наблюдалось демонстративных различий между сроками отторжения нативных трансплантатов и аналогичных тканей, обработанных слабыми растворами формалина.