Активация клеток

Наиболее распространенным в лабораторной практике является метод исследования функциональной активности Т-клеток с помощью реакции бласттраисформа-ции лимфоцитов крови под влиянием ФГА. В 1959 г. Hunderford с соавт. дали первое описание феномена трансформации лимфоцитов in vitro, а в 1961 г. Cars-tairs доказал, что стимулированные делящиеся клетки происходят из малых лимфоцитов. Термин иммуно-бласт в 1963 г. предложил Dameshek для обозначения клеток, которые под влиянием стимулятора митозов (ми-тоген) трансформируются из малых лимфоцитов в большие. Бласты - крупные клетки (диаметр их>15 мкм) с. большим количеством свободных рибосом, эндотелиаль-ным ретикулумом и аппаратом Гольджи.

После работ F. Bach и Hirschorn (1964), а также Bain и соавт. (1964) появилась возможность поддержания стабильной культуры лимфоцитов и реакция бласттранс-формации стала популярным методом изучения клеточного иммунитета. Начальный этап реакции на различные специфические и неспецифические антигены, по-видимому, одинаков, малый лимфоцит превращается в большую незрелую клетку-иммунобласт. Эта первая стадия иммунного ответа, с одной стороны, обеспечивает увеличение количества отвечающих клеток, а с другой - повышает их функциональные возможности, возвращая эти клетки в недифференцированное состояние. Дальнейшая судьба этих клеток зависит от того, какой стимулятор вызвал их изменения. Под влиянием неспецифических стимуляторов (ФГА, Кон-А) наблюдается неспецифическая стимуляция пролиферации иммуноком-петентных клеток. Активация клеток происходит не за счет включения митогенов внутрь цитоплазмы, а благодаря рецепторам их мембран (Greaves, Bauminger, 1972). Не получая антигенной информации, бласты после деления погибают или вновь дифференцируются в лимфоцит. В уже дифференцированных клетках митоген концентрируется в ядре и на ядерной мембране (Lewis, Pegrum, 1974). В начале реакции усиливается синтез РНК и белка, а затем продукция ДНК (через 24-36 ч после стимуляции), что совпадает по времени с синтезом ДНК в антигенчувствительных клетках при первичном иммунном ответе. Для осуществления такого клеточного цикла необходимо 48 ч, затем реакция нарастает до 120 ч, после чего происходит ее затухание.