Определение кортикостероидов в биологических объектах

Колонка длиной 132 см и внутренним диаметром 5 мм была наполнена 0,65% не опентилгликольсукцината на промытом кислотой и  целите, 100-120 меш.

Работа производилась при температуре колонки 230°, газо потоке 130 мл аргона в 1 минуту, напряжении на детекторе 1750 в и чувствительности X 10. Эффективность колонки составляла примерно 1300 т, т, по андрост-триону. Следует заметить, что, по данным автора практически ежедневное, но рациональное использование колонки почти не привело к снижению эффективности в течение 3 месяцев ее работы.

При исследованиях, проведенных с использованием химически чистых веществ, было показано, что хроматографирование окисленных продуктов позволяет добиться точности количественного определения стероидов в ±2-8,5%. Потери кортикостероидов при работе с биологическим материалом в результате экстракции и перевода их в соответствующие производные висмутатом натрия измерялись путем добавления в каждом отдельном случае определенного количества оксиандрост-1,4-диен-3,17-диона.

Как известно, чувствительность метода или прибора зависит во многом от чувствительности детектора. В этом случае, по данным Bailey, минимально определяемое количество оксиандрост-1,4-диен-3,17-диона составляло 0,05 мкг в вводимой пробе, а наличие кортизола могло быть количественно учтено при содержании последнего в 4-часовой порции мочи от 2 мкг и более.

Из других работ, относящихся к определению кортикостероидов методом газо-жидкостной хроматографии, следует упомянуть работу Brooks (1964) по определению указанных стероидных соединений и близких к ним производных 20-оксипрегнана, Horning с сотрудниками (1960, 1963), а также Murphy, Bailey и West. В последней методом газовой хроматографии показан эффект подавления функции коры надпочечников после введения 16-метиленпред-низолона.