Температура

Нагрев вызывает денатурацию или плавление нуклеиновой кислоты, разрывая связи, крепящие биспиральные структуры; при этом нативная конформация утрачивается, и полинуклеотид-ные цепи переходят в состояние неупорядоченных клубков. За денатурацией нуклеиновых кислот удобно следить по усилению поглощения ультрафиолетовых лучей в области 260 нм (гипер-хромный эффект). Температура, вызывающая 50 %-ное разрушение спиральной структуры, обозначается символом Тт и является мерилом жесткости молекул нуклеиновой кислоты. Многочисленные данные показывают, что Тт нуклеиновой кислоты тем выше, чем больше содержится в молекуле Г-Ц-пар. В двунит-чатой структуре ДНК с определенной степенью вероятности непрерывно происходят мгновенные размыкания и замыкания водородных связей между комплементарными нуклеотидами. Область таких микрораскрытий чаще всего охватывает 1-2 пары нукле-отидов. Вероятность раскрытия внутри спирали порядка 10~4. Чаще раскрываются А-Т-пары, чем более прочные Г-Ц-пары. Частота актов размыкания и смыкания находится в обратной корреляции с содержанием Г-Ц-пар и с температурой денатурации ДНК - Тт. Этот тип флуктуации называется breathing (дыхание) и имеет большое значение для выполнения функций, требующих экспонирования азотистых оснований. К ним относятся такие важные процессы, как репликация и транскрипция (Frank-Kamenetskii, Lazurkin, 1974). Таким образом, относительное содержание Г-Ц-пар и температура плавления Тт отражают реакционную способность ДНК.