Метод водородного обмена

Аналогичный результат был получен Вютрихом с соавторами (Wuthrich et al., 1980) на панкреатическом ингибиторе трипсина. Авторы исследовали у исходного белка и у его семи химических модификаций скорость водородного обмена и термостабильность. Различные модификации отличались по скорости водородного обмена, что указывало на их существенно различную внутреннюю подвижность. С этим полностью коррелировали различия теплоустойчивости у по-разному модифицированных белков.

Опыты на тропоколлагене и на панкреатическом ингибиторе трипсина показывают, что температура денатурационного перехода действительно отражает конформационную подвижность белка в зоне физиологических температур.

Возникает вопрос, в какой мере конформационная лабильность, оцениваемая тепловой денатурацией, характеризует ту внутримолекулярную подвижность, которая связана с выполнением белком его биохимических функций. Тот факт, что вариации терморезистентности белка, как генотипические, так и модификационные, сопровождаются соответствующими изменениями устойчивости к разным протеиназам и изменением скорости водородного обмена, говорит о том, что степенью термостабильности белка оценивается не локальная, а общая жесткость конструкции белковой макромолекулы. Она должна охватывать и функциональную подвижность белка.