Степень кооперативной денатурации

Степень кооперативнQQ денатурации у разных белков может очень сильно варьировать, вплоть до почти полного ее отсутствия. N-конец (1-51 аминокислотных остатка) lac-репрессора представляет собой глобулу с вполне определенной структурой, лишенную S-S-сшивок. По мере повышения температуры происходит градуальное и обратимое развертывание глобулы при крайне слабой кооперативности (Wemmer et al., 1981).

В настоящее время в литературе уже накопилось и продолжает накапливаться много сведений о наличии одной или нескольких более или менее стабильных промежуточных стадий при переходе нативного белка в денатурированное состояние. На ряде белков переходные стадии обнаружены и при действии наиболее активных денатураторов - мочевины и хлористого гуанидина (Saito, Wada, 1983а, 1983b). Этому способствовало, в частности, применение методов быстрой кинетики - методов остановленной струи и температурного или рН-скачка (Baldwin, 1975). Приведу ряд примеров, не пытаясь исчерпать все имеющиеся к настоящему моменту данные.

Значение первичной структуры для характера перехода от нативного к денатурированному состоянию можно продемонстрировать путем сопоставления денатурации хлористым гуанидином а-лактальбумина и лизоцима. Эти белки крайне интересны: их аминокислотные составы удивительно сходны, что говорит об общности происхождения, однако в функциональном отношении они между собой ничего общего не имеют. Лизоцим - фермент, гидролизирующий специфические глюкозидные связи; а-лактальбумин ферментативной активностью не обладает, он меняет специфичность фермента, участвующего в синтезе лактозы.8 Несмотря на сходство первичной структуры, по отношению к денатураторам эти белки ведут себя по-разному. Глобула а-лактальбумина очень чувствительна к сдвигу рН и при рН 2.5 переходит в А-форму.