Сопоставление функциональных и денатурационных изменений белков

Это и дало повод некоторым авторам представлять денатурацию белков как процесс двух состояний. Однако Дж. Ф. Брандтс (1973) справедливо указывал, что вопрос о том, отвечает ли процесс развертывания белка теории двух состояний или нет, может и должен быть решен в первую очередь экспериментально, а не теоретически, и для каждого белка должен быть получен собственный ответ (с. 194). Естественно, что к схеме двух состояний ближе будет развертывание малых, компактных белков, глобула которых представляет собой единую кооперативную систему, чем развертывание белков со сложной доменной структурой, у которых кооперативные отношения в значительной мере ограничены отдельными сегментами макромолекулы (Privalov, 1979, 1982). К этому нужно добавить, что наличие или отсутствие более или менее устойчивых промежуточных состояний определяется не только структурой белка, но также природой денатуратора и условиями, в которых денатурация протекает.

Для распознания нарушений происходящих в разных структурных этажах белковой макромолекулы, в распоряжении исследователей имеется богатый арсенал методов (Lapanje, 1978; Волькенштейн, 1981).

Самый информативный метод изучения пространственной структуры белковых молекул - рентгеноструктурный анализ кристаллов белка - для изучения денатурации пока почти не использован (Yonath et al., 1977а, 1977b). Начал привлекаться метод диффузного рассеяния рентгеновских лучей белковыми растворами, позволяющий судить о подвижности отдельных частей макромолекулы (Ptitsyn, 1978). Важную информацию об изменениях, происходящих при денатурации, дает сканирующая микрокалориметрия. С ее помощью прослеживаются поглощение тепла и изменение теплоемкости в растворе белка по мере повышения температуры. При этом получаются кривые, на которых распознаются температурные зоны перехода белка в менее упорядоченное состояние, а по площадям под кривыми непосредственно определяется величина энтальпии перехода (Privalov, 1979).